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PCR仪基本要素

基本的PCR须具备

1.要被拷贝的DNA模板 Template

2.界定拷贝范围两端的引物Primers.

3.DNA聚合酶Taq. Polymearse

4.合成的原料（四种脱氧核苷酸）及水。

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PCR仪的改进与完善

Mullis起初使用的DNA聚合酶是 DNA 聚合酶 I 的Klenow片段，1988年初，Keohanog改用T4 DNA聚合酶进行PCR，其扩增的DNA片段很均一，真实性也较高，只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次，仍需加入新酶。1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜thermus aquaticus 中提取到一种耐热DNA聚合酶。 

此酶具有以下特点：

①耐高温，在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%，在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%，在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。

②在热变性时不会被钝化，不必在每次扩增反应后再加新酶。

③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率，增加了扩增长度2.0Kb。由于提高了扩增的特异性和效率，因而其灵敏性也大大提高。为与大肠多聚酶IKlenow片段区别，将此酶命名为TaqDNA多聚酶Taq DNAPolymerase。此酶的发现使PCR广泛的被应用。

PCR仪分类介绍

梯度PCR仪

把一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（温度梯度），通常有12种温度梯度，这样的仪器就叫梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段，退火温度是不同的，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR扩增，就可以筛选出表达量高的退火温度，进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增，这样节约成本的同时也节约了时间。主要用于科研，教学机构。梯度PCR仪，在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增。具有双槽梯度的不多，领成具备此功能。